产品货号:
KD0641
中文名称:
IPTG溶液(200mg/mL)
英文名称:
IPTG storage solution(200mg/ml)
产品规格:
5mL
发货周期:
1~3天
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产品说明:
IPTG是β–半乳糖苷酶的活性诱导物质。蓝白斑筛选中,IPTG作为安慰性诱导物诱导细菌内的蛋白表达,X-gal作为生色底物。其原理为IPTG可诱导载体Lac操纵子DNA区段合成β-半乳糖苷酶氨基端片段,该片段可与宿主细胞编码的缺陷型β-半乳糖苷酶实现基因内互补(α互补),实现α互补的细菌铺在含有X-gal生色底物的培养基上,可形成蓝色菌落;而外源DNA插入质粒的多克隆位点后,可破坏α互补作用,培养基上将长出白色菌落。IPTG也是常用的基因工程中重组蛋白表达的诱导剂。
0.1M IPTG储存液配制:
1)称取0.238g IPTG;加入去离子水至10mL,完全溶解;
2)用5~10mL去离子水润湿0.22μm针头过滤,IPTG溶液过膜除菌;
3)分装成1mL,-20℃冻存,有效期可达1年。
蓝白斑筛选:
(1)制作平板:将100mL含琼脂培养基高压灭菌后的冷却至55℃以下时,加入500μL的X-gal溶液(20mg/mL)、250μL的IPTG溶液(50mg/mL)和100μL的抗生素(氨苄青霉素,100mg/mL),制作成含X-Gal、IPTG和抗生素(Amp)平板培养基。
实际操作中X-gal和IPTG可以直接涂抹在平板培养基表面,90mm的平板,X-gal(20mg/mL)涂40μL,IPTG(50mg/mL)涂16μL。150mm的平板使用量加倍,待涂布的液体干后就可以使用。
(2)细菌铺板:37℃过夜培养,可根据长出菌体的蓝白色,而方便地挑选出基因重组体(白色菌落为具有DNA插入片段的基因重组体)。
注意事项:
1.含有IPTG的培养基4℃避光保存,须在1周内使用。
2.本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗,食品及化妆品等用途。
3.为了您的安全和健康,请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。
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